Zestaw CHO HCP ELISA

Nr kat.: HCP0032A

Opakowanie: 96T

Opis produktu

Data produktu

W tym teście stosowana jest jednoetapowa immunosorbcyjna metoda ELISA.Próbki zawierające CHOK1 HCP reagują jednocześnie ze znakowanym HRP kozim przeciwciałem anty-CHOK1 i przeciwciałem anty-CHOK1 opłaszczonym na płytce ELISA, ostatecznie tworząc kompleks kanapkowy przeciwciało w fazie stałej-przeciwciało znakowane HCP.Niezwiązane antygen-przeciwciało można usunąć poprzez przemycie płytki ELISA.Do studzienki dodaje się substrat TMB w celu zapewnienia wystarczającej reakcji.Wybarwianie się zostaje zatrzymane po dodaniu roztworu zatrzymującego i odczytuje się wartość OD lub absorbancji roztworu reakcyjnego przy 450/650 nm za pomocą czytnika mikropłytek.Wartość OD lub wartość absorbancji jest proporcjonalna do zawartości HCP w roztworze.Na tej podstawie można obliczyć stężenie HCP w roztworze zgodnie z krzywą standardową.

Poprzedni: Zestaw do genotypowania myszy HCR2021A

Następny: Dwuniciowy RNA (dsRNA) ZESTAW ELISA HCP0033A

Aplikacja

Zestaw ten służy do ilościowego wykrywania zawartości reszt białkowych komórki gospodarza CHOK1 w próbkach.

Ckomponenty

S/N	Część	Stężenie	Warunki przechowywania
1	Standard CHOK1 HCP	0,5 mg/ml	≤–20 ℃
2	Anty-CHO HCP-HRP	0,5 mg/ml	≤–20℃, chronić przed światłem
3	TMB	NA	2-8 ℃, chronić przed światłem
4	20 × PBST 0,05%	NA	2-8 ℃
5	Zatrzymaj rozwiązanie	NA	RT
6	Uszczelniacze mikropłytek	NA	RT
7	BSA	NA	2-8 ℃
8	Płytki z powłoką wstępną o wysokiej adsorpcji	NA	2-8 ℃

Wymagany sprzęt

Materiały eksploatacyjne / sprzęt	Produkcja	Katalog
Czytnik mikropłytek	Urządzenia molekularne	Spectra Max M5, M5e lub odpowiednik
Termomixer	Eppendorfa	Eppendorf/5355 lub odpowiednik
Mikser wirowy	IKA	MS3 Digital lub odpowiednik

Przechowywanie i stabilność

1.Transport w temperaturze -25~-15°C.

2.Warunki przechowywania przedstawiono w tabeli 1;składniki 1-2 są przechowywane w temperaturze ≤–20°C, 5-6 są przechowywane w temperaturze pokojowej,3,4, 7, 8 są przechowywane w temperaturze 2-8 ℃;okres ważności wynosi 12 miesięcy.

Parametry produktu

1.Czułość: 1 ng/ml

2.Zakres wykrywania: 3-100 ng/ml

3.Precyzja: CV wewnątrz testu ≤ 10%, CV między testami ≤ 15%

4.Zasięg HCP: >80%

5.Specyfika: Zestaw ten jest uniwersalny, ponieważ specyficznie reaguje z CHOK1 HCP niezależnie od procesu oczyszczania.

Przygotowanie odczynnika

1.PBST 0,05%

Weź 15 ml 20×PBST 0,05% rozcieńczonego w ddH₂O i uzupełniono do 300 ml.

2.1,0% BSA

Pobrać 1 g BSA z butelki i rozcieńczyć w 100 ml PBST 0,05%, dobrze wymieszać aż do całkowitego rozpuszczenia i przechowywać w temperaturze 2-8°C.Przygotowany bufor do rozcieńczania jest ważny przez 7 dni.Zaleca się przygotowanie w razie potrzeby.

3.Roztwór do wykrywania 2 μg/ml

Pobrać 48 µl 0,5 mg/ml Anti-CHO HCP-HRP i rozcieńczyć w 11 952 µl 1% BSA, aby uzyskać końcowe stężenie roztworu detekcyjnego wynoszącego 2 µg/ml.

4.Kontrola jakości i przygotowanie standardów CHOK1 HCP

Rura NIE.	Oryginalny rozwiązanie	Stężenie ng/ml	Tom µl	1% BSA Tom µl	maksymalna głośność µl	Finał stężenie ng/ml
A	Standard	0,5 mg/ml	10	490	500	10 000
B	A	10 000	50	450	500	1000
S1	B	1.000	50	450	500	100
S2	S1	100	300	100	400	75
S3	S2	75	200	175	375	40
S4	S3	40	150	350	500	12
S5	S4	12	200	200	400	6
S6	S5	6	200	200	400	3
NC	NA	NA	NA	200	200	0
QC	S1	100	50	200	250	20

Tabela: Przygotowanie kontroli jakości i standardów

Procedura testowa

1.Przygotować odczynniki zgodnie z opisem w części „Przygotowanie odczynników” powyżej.

2.Do każdego dołka należy pobrać 50 µl standardów, próbek i kontroli jakości (patrz Tabela 3), a następnie dodać 100 µl roztworu do wykrywania (2 µg/ml);Przykryj płytkę uszczelniaczem i umieść płytkę ELISA na termomikserze.Inkubować przy 500 obr./min, 25 ± 3°C przez 2 godziny.

3.Odwróć mikropłytkę w zlewie i wyrzuć roztwór powlekający.Odpipetuj 300 μl 0,05% PBST do każdej studzienki, aby przemyć płytkę ELISA i wyrzucić roztwór, a następnie powtórz płukanie 3 razy.Odwróć płytkę na czystym ręczniku papierowym i osusz.

4.Dodać 100 µl substratu TMB (patrz tabela 1) do każdej studzienki, zamknąć płytkę ELISA i inkubować w ciemności w temperaturze 25 ± 3°C przez 15 minut.

5.Odpipetuj 100 µl roztworu zatrzymującego do każdego dołka.

6.Zmierzyć absorbancję przy długości fali 450/650 nm za pomocą czytnika mikropłytek.

7.Analizuj dane za pomocą oprogramowania SoftMax lub równoważnego.Wykreśl krzywą standardową, korzystając z czteroparametrowego modelu regresji logistycznej.

Przykład krzywej standardowej

UWAGA: Jeżeli stężenie HCP w próbce przekracza górną granicę krzywej standardowej, przed badaniem należy ją odpowiednio rozcieńczyć buforem rozcieńczającym.

NOTATKI

Roztworem zatrzymującym jest 2M kwas siarkowy. Należy zachować ostrożność, aby uniknąć rozpryskiwania!