Polimeraza DNA Hotstart Taq (5u/ul)
Polimeraza DNA Taq to polimeraza DNA typu hot start z podwójnym blokowaniem przez podwójne przeciwciała. Produkt ten nie tylko blokuje aktywność polimerazy 5′ → 3′ polimerazy DNA Taq, ale także blokuje aktywność 5′ → 3′ egzonukleazy.Ogrzewanie przez 30 sekund w temperaturze poprzedzającej denaturację może całkowicie inaktywować przeciwciało i uwolnić aktywność polimerazy DNA i aktywność egzonukleazy.Charakterystyka podwójnego blokowania może nie tylko skutecznie zapobiegać niespecyficznej amplifikacji spowodowanej niedopasowaniem lub dimerem startera, ale także skutecznie hamować spadek sygnału fluorescencji spowodowany degradacją sondy, dzięki czemu odczynnik do wykrywania in vitro jest bardziej stabilny podczas transportu lub stosowania w pomieszczeniu temperatura.
składniki
| Część | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
| Polimeraza DNA Taq(5 U/µL) | 50 µl | 200 µl | 2 ml | 5 ml |
Stan przechowywania
Produkt jest dostarczany z suchym lodem i można go przechowywać w temperaturze -25°C ~ -15°C przez 2 lata.
Dane techniczne
| Polimeraza | Polimeraza DNA Taq |
| Czystość | ≥ 95% (STRONA SDS) |
| Gorący start | Wbudowany gorący start |
| Szybkość reakcji | Standard |
| Aktywność egzonukleazy | 5′ → 3′ |
Instrukcje
Konfiguracja reakcji
| składniki | Tom (µl) | Końcowe stężenie |
| 2× Bufora | 25 | 1× |
| Mieszanka startera/sondyB | × | 0,1 μmol/L-0,5 μmol/L |
| Polimeraza Taq Hotstart (5U/μL) | 1.2 | 0,12 U/µL |
| Szablon DNAc | × | 0,1-100 ng |
| ddH2O | Do 50 | - |
Uwagi:
1) Zgodnie z konkretnym zastosowaniem eksperymentalnym konieczne jest przygotowanie odpowiedniego buforu reakcyjnego.
2) Zalecanymi stężeniami są ilość DNA i stężenie sond lub starterów.Optymalne stężenie można dostosować w zależności od konkretnych warunków doświadczalnych.
Protokół cyklu termicznego
| Krok | Temperatura(°C) | Czas | Cykle |
| Wstępna denaturacja | 95 ℃ | 5 minut | 1 |
| Denaturacja | 95 ℃ | 15 sek | 45 |
| Wyżarzanie / przedłużanie | 60 ℃A | 30 sekb |
Uwagi:
1) Temperaturę reakcji dostosowuje się w zależności od wartości Tm projektowanych starterów.
2) Różne instrumenty qPCR wymagają innego czasu akwizycji sygnału fluorescencji, należy ustawić go zgodnie z najkrótszym limitem czasu.
Notatki
Aby zapewnić sobie zdrowie i bezpieczeństwo, należy nosić niezbędne środki ochrony indywidualnej, takie jak fartuch laboratoryjny i rękawiczki!
