Multipleksowa jednoetapowa premiks RT-qPCR
Opis
Nr kat.: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix to multipleksowy zestaw ilościowy do PCR oparty na RNA jako matrycy.W eksperymencie w tej samej probówce reakcyjnej przeprowadza się odwrotną transkrypcję i ilościową PCR, co upraszcza operację eksperymentalną i zmniejsza ryzyko zanieczyszczenia.Unikalna konstrukcja mieszanki buforów i enzymów może być stosowana w jednoetapowym systemie liofilizowanym.Zestaw wykorzystuje odporną na ciepło odwrotną transkryptazę do wydajnej syntezy pierwszej nici cDNA przy użyciu gorącej polimerazy DNA Taq do ilościowej amplifikacji.Zawiera zoptymalizowany bufor reakcyjny, mieszankę enzymów itp. oraz dodano czynniki, które skutecznie hamują nieswoistą amplifikację PCR i zwiększają wydajność amplifikacji w wielu reakcjach qPCR, umożliwiając ilościową amplifikację wielokrotnej fluorescencji, zapewniając jednocześnie skuteczność amplifikacji starterów.
składniki
| Nazwa |
| 1. Lyo-bufor |
| 2. Mieszanka lio-enzymów |
| 3. Ochrona Lyo |
Stan transportujon
Odp.: Lyo-bufor i środek ochronny: -25 ~ -15 ℃, okres przydatności do spożycia wynosi 1 rok.
B: Mieszanka lio-enzymów, 2-8 ℃, okres przydatności do spożycia wynosi 6 miesięcy.
Instrukcja obsługi
1. Układ reakcyjny (na przykład weź 25 μL)
| składniki | Objętość (µL) | Końcowe stężenie |
| Lyo-bufor | 6 | 1* |
| Mieszanka lio-enzymów | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Mieszanka podkładowa (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Mieszanka sond (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5µM |
| Szablon RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Do 25 | - |
2. Zoptymalizowany protokół rowerowy
1) Standardowy protokół rowerowy
| Etap reakcji | Temperatura | Czas | Cykl | |
| 1 | Transkrypcja odwrotna | 50°Ca | 10 minut | 1 |
| 2 | Początkowa denaturacja | 95°C | 5 minut | 1 |
| 3 | Reakcja amplifikacji | 95°C | 15 sek | 45 cykli |
| 60°Cb | 30 sekc |
2) Protokół szybkiej jazdy rowerowej
|
| Etap reakcji | Temperatura | Czas | Cykl |
| 1 | Transkrypcja odwrotna | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Początkowa denaturacja | 95°C | 2 sekundy | 1 |
| 3 | Reakcja amplifikacji | 95°C | 1 sekunda |
45 cykli |
| 60°Cb | 13 sekc |
Notatka:
a) Odwracać transkrypcja: Można ustawić temperaturę 42°C lub 50°C na 10–15 minut.
b) Reakcja amplifikacji: Temperaturę reguluje się w zależności od wartości Tm projektowanych podkładów.
C)Fluorescencja sygnał nabytek: Proszę ustawić procedurę eksperymentalną zgodnie z wymaganiamiinstrukcja instrumentu.
Informacje techniczne/Specyfikacje
| Gorący start | Wbudowany gorący start |
| Metoda wykrywania | Wykrywanie startera-sondy |
| Metoda PCR | Jednoetapowy RT-qPCR |
| Rodzaj próbki | RNA |
Notatki
1. Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do celów badawczych.
2. Aby zapewnić sobie zdrowie i bezpieczeństwo, należy nosić niezbędne środki ochrony indywidualnej, takie jak fartuch laboratoryjny i rękawiczki!
