Peroksydaza (źródło chrzanu) Synonim: Oksydoreduktaza nadtlenku wodoru;HRP

Peroksydaza chrzanowa (HRP) jest izolowana z korzeni chrzanu rusticana (Amoracia rusticana) i należy do grupy peroksydaz ferroprotoporfirynowych.HRP łatwo łączy się z nadtlenkiem wodoru (H2O2).Powstały kompleks [HRP-H2O2] może utleniać szeroką gamę donorów wodoru:
Dawca + H2O2 → Utleniony Donor + 2 H2O
HRP będzie utleniać różne substraty (patrz tabela 1):
• Chromogenny
• Chemiluminescencyjne (takie jak luminol lub izoluminol)
• Fluorogenne (takie jak tyramina, kwas homowanilinowy lub kwas 4-hydroksyfenylooctowy)
HRP jest polipeptydem jednołańcuchowym, który zawiera cztery mostki dwusiarczkowe.HRP to glikoproteina zawierająca 18% węglowodanów.Skład węglowodanów składa się z galaktozy, arabinozy, ksylozy, fukozy, mannozy, mannozy i galaktozaminy, w zależności od konkretnego izozymu.

HRP jest powszechnie stosowanym znacznikiem dla immunoglobulin w wielu różnych zastosowaniach immunochemicznych, w tym immunoblotingu, immunohistochemii i ELISA.HRP można sprzęgać z przeciwciałami kilkoma różnymi metodami, w tym za pomocą aldehydu glutarowego, utleniania nadjodanu, poprzez wiązania dwusiarczkowe, a także za pomocą środków sieciujących ukierunkowanych na grupy aminowe i tiolowe.HRP jest najbardziej pożądanym znacznikiem dla przeciwciał, gdyż jest najmniejszym i najbardziej stabilnym z trzech najpopularniejszych znaczników enzymatycznych (peroksydaza, β-galaktozydaza, fosfataza alkaliczna), a jego glikozylacja prowadzi do mniejszego wiązania nieswoistego.Opublikowano przegląd metod sprzęgania z aldehydem glutarowym i nadjodanem.

Peroksydazę wykorzystuje się także do oznaczania glukozy4 i nadtlenków w roztworze.W kilku publikacjach, 6-24 tezach, 25-29 i rozprawach 30-46 cytowano użycie P8375 w swoich protokołach badawczych.