Fosfataza alkaliczna (ALP)
Opis
Fosfataza alkaliczna pochodzi z rekombinowanego szczepu E. coli niosącego gen TAB5.Enzym katalizuje defosforylację końców 5' i 3' fosfomonoestrów DNA i RNA.Hydrolizuje także rybozę, a także trifosforany dezoksyrybonukleozydów (NTP i dNTP).Fosfataza alkaliczna TAB5 działa na 5' wystające, 5' wgłębione i tępe końcówki.Fosfatazę można stosować w wielu zastosowaniach biologii molekularnej, takich jak klonowanie lub znakowanie końców sond w celu usunięcia fosforylowanych końców DNA lub RNA.W doświadczeniach z klonowaniem defosforylacja zapobiega samoligacji linearyzowanego plazmidowego DNA.Może również rozkładać niewbudowane dNTP w reakcjach PCR w celu przygotowania matrycy do sekwencjonowania DNA.Enzym jest całkowicie i nieodwracalnie inaktywowany przez ogrzewanie w temperaturze 70°C przez 5 minut, dzięki czemu usuwanie fosfatazy przed ligacją lub końcowym znakowaniem nie jest konieczne
Stosowanie
1. Fosfataza alkaliczna sprzężona z białkami (przeciwciałami, streptawidyną itp.) może specyficznie identyfikować cząsteczki docelowe i może być stosowana w testach ELISA, WB i detekcji histochemicznej;
2.Do odfosforyzowania 5'-końca DNA lub RNA można zastosować fosfatazę alkaliczną, aby zapobiec samosprzężeniu;
3. Powyższy defosforylowany DNA lub RNA można znakować znakowanymi radioaktywnie fosforanami (poprzez kinazę polinukleotydową T4)
Struktura chemiczna
Specyfikacja
Elementy testowe | Dane techniczne |
Aktywność enzymatyczna | 5U/μL |
Aktywność endonukleazy | Niewykryty |
Aktywność egzonukleazy | Niewykryty |
Aktywność Nickowania | Niewykryty |
Aktywność RNazy | Niewykryty |
DNA E. coli | ≤1 kopia/5U |
Endotoksyna | Test LAL, ≤10EU/mg |
Czystość | ≥95% |
Przewożenie i przechowywanie
Transport:Otoczenia
Składowanie :Przechowywać w temperaturze 2-8°C
Zalecane ponowne przetestowanieŻycie:2 lata