2×PCR Master Mix (bez barwnika)
PCR Master Mix to rodzaj konwencjonalnego, wstępnie zmieszanego roztworu do PCR, który jest gotowy do użycia, zawierający polimerazę DNA Taq, mieszankę dNTP MgCl2 i zoptymalizowany bufor.Podczas reakcji do amplifikacji można dodać jedynie starter i matrycę, co znacznie upraszcza etapy operacji eksperymentu.Produkt zawiera doskonałe stabilizatory i można go przechowywać przez 3 miesiące w temperaturze 4℃.Produkt PCR ma występ 3′-dA i można go łatwo wklonować do wektora T.
Warunki przechowywania
Produkt należy przechowywać w temperaturze -25℃ ~ -15℃ przez dwa lata.
Dane techniczne
| Wierność (w porównaniu z Taq) | 1× |
| Gorący start | No |
| Zwis | 3′-A |
| Polimeraza | Polimeraza DNA Taq |
| Format reakcji | SuperMix lub Master Mix |
| Szybkość reakcji | Standard |
| Rodzaj produktu | Master Mix do PCR (2×) |
Instrukcje
1.Układ reakcji
| składniki | Rozmiar (µl) |
| Szablon DNA | Odpowiedni |
| Podkład 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Podkład 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Mieszanka główna PCR | 25 |
| ddH2O | Do 50 |
2.Protokół amplifikacji
| Kroki cyklu | Temperatura (°C) | Czas | Cykle |
| Wstępna denaturacja | 94 ℃ | 5 minut | 1 |
| Denaturacja | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Wyżarzanie | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Rozszerzenie | 72 ℃ | 30-60 sek./kb | |
| Ostateczne przedłużenie | 72 ℃ | 10 minut | 1 |
Uwagi:
1) Użycie szablonu: 50-200 ng genomowego DNA;0,1-10 ng plazmidowego DNA.
2) mgr2+stężenie: Ten produkt zawiera 3 mM MgCl2 odpowiedni do większości reakcji PCR.
3) Temperatura wyżarzania: Proszę odnieść się do teoretycznej wartości Tm gruntów.Temperaturę wyżarzania można ustawić na 2-5 ℃ niższą niż teoretyczna wartość podkładu.
4) Czas wydłużania: Do identyfikacji molekularnej zaleca się 30 s/kb.Do klonowania genów, 60s/kb jest zalecane.
Notatki
1.W trosce o Państwa bezpieczeństwo i zdrowie prosimy o noszenie fartuchów laboratoryjnych oraz rękawiczek jednorazowych.
2.Tylko do celów badawczych!
