DNaza I (wolna od Rnazy) (2u/ul)
Nr kat.: HC4007B
DNaza I jest endonukleazą, która może trawić jedno- lub dwuniciowy DNA.Może hydrolizować wiązania fosfodiestrowe z wytworzeniem mono- i oligodeoksynukleotydów zawierających grupę 5'-fosforanową i grupę 3'-OH.Optymalny zakres pH roboczego DNazy I wynosi 7-8.Aktywność DNazy I zależy od Ca2+i może być aktywowany przez jony metali dwuwartościowych, takich jak CO2, Mn2+, Zn2+itp. W obecności Mg2+, DNaza I może losowo przeciąć dowolne miejsce dwuniciowego DNA;Będąc w obecności Mn2+, DNaza I może przeciąć dwuniciowy DNA w tym samym miejscu, tworząc tępe lub lepkie końce z wystającymi 1-2 nukleotydami.Może być stosowany do przetwarzania różnych próbek RNA.
składniki
Nazwa | 1KU | 5KU |
Rekombinowana DNazaI (wolna od RNazy) | 500 µL | 5 × 500 µl |
Bufor reakcyjny DNazy I (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Warunki przechowywania
Ten produkt należy przechowywać w temperaturze -25 ~ -15 ℃ przez 2 lata.Należy unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania.
Instrukcje
Stosowany do usuwania DNA z próbek RNA wyłącznie w celach informacyjnych.
1. Do przygotowania następującego układu reakcyjnego należy użyć probówek wirówkowych i końcówek do pipet wolnych od RNaz:
składniki | Objętość (µL) |
Bufor reakcyjny DNazy I (10×) | 1 |
Rekombinowany DNasel (wolny od RNazy) | 1 |
RNA | X |
ddH wolny od RNazy2O | Do 10 |
2. Warunki reakcji są następujące: 37°C, po 15-30 minutach dodać końcowe stężenie 2,5 mM roztworu EDTA i dobrze wymieszać, następnie 65°C przez 10 minut.Przetworzoną matrycę można wykorzystać do kolejnych eksperymentów RT-PCR, RT-qPCR itp.
Notatki
1. DNaza l jest wrażliwa na denaturację fizyczną;Podczas mieszania delikatnie odwrócić probówkę idobrze wstrząśnij, nie potrząsaj mocno.
2. Enzym powinien być przechowywany w lodówce lub w łaźni lodowej, gdy jest używany, a bezpośrednio po użyciu powinien być przechowywany w temperaturze -20°C.
3. Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do celów badawczych.
4. Dla własnego bezpieczeństwa należy używać fartuchów laboratoryjnych i rękawiczek jednorazowych.