Kolorometryczny RT-LAMP (kulka liofilizowana)
Produkt zawiera bufor reakcyjny, mieszankę enzymów RT (polimeraza DNA Bst i odporna na ciepło odwrotna transkryptaza), liofilizowane środki ochronne i chromogenne składniki barwników.Produkt jest liofilizowanym typem kulki, do stosowania wyłącznie z podkładami i szablonami.Zestaw ten umożliwia szybkie i wyraźne wizualne wykrywanie wzmocnienia, którego reakcja ujemna jest oznaczona kolorem czerwonym, a reakcja pozytywna zmianą koloru na żółty.
Część
Master Mix kolorymetryczny RT-LAMP (kulki liofilizowane)
Aplikacje
Do izotermicznej amplifikacji DNA lub RNA.
Warunki przechowywania
Transportowane i przechowywane w temperaturze 2 ~ 8 ℃.Produkt ważny jest 12 miesięcy.
Protokół
1.Wyjmij odpowiednią liczbę liofilizowanych kulek w proszku zgodnie z liczbą testów.
2.Przygotuj mieszaninę reakcyjną
Część | Tom |
Master Mix kolorymetryczny RT-LAMP (kulki liofilizowane) | 1 sztuka (2 koraliki) |
10 × Mieszanka podkładowaa | 5 µL |
Szablony DNA/RNA b | 45 µL |
Uwagi:
1. 10× Stężenie mieszaniny podkładów: 16 µM FIP/BIP, 2 µM F3/B3, 4 µM Loop F/B;
2. Zaleca się rozpuszczanie szablonów kwasów nukleinowych w wodzie DEPC.
3.Inkubować w temperaturze 65°C przez 30–45 minut, który można odpowiednio wydłużyć w zależności od zmiany koloru. Czas reakcji.
4.Gołym okiem widać, że żółty jest pozytywny, a czerwony negatywny.
Notatki
1.Temperaturę reakcji można optymalizować w zakresie od 62 ℃ do 68 ℃ w zależności od stanu podkładu.
2.Zapakowane odczynniki nie powinny być wystawiane na działanie powietrza przez dłuższy czas.
3.Reakcja odbarwienia na czerwono i żółto zależy od zmiany pH układu reakcyjnego, proszę nie używać roztworu do przechowywania kwasu nukleinowego zawierającego Tris, zalecanego do stosowania ddH2O zmagazynowany kwas nukleinowy.
4.Doświadczenie należy przeprowadzić w sposób znormalizowany, obejmujący przygotowanie układu reakcyjnego, obróbkę próbki i dodanie próbki.
5.Sugeruje się przygotowanie układu reakcji w ultra czystym stole i dodanie szablonów w dygestorium w innych pomieszczeniach, aby uniknąć błędnych wyników.